24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2639  |  回复: 13

yougu1314

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨默格

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2018-09-04 11:49:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

balalalabala

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yougu1314(渊博震天代发): 金币+5, 鼓励回帖交流 2018-09-04 15:21:26
我遇到过同样的问题,应该是标签为暴露在蛋白的表面,所以没办法纯化,试试gst融合蛋白表达,还可以试试重折叠,还有硫酸铵沉淀,还有就是把his标签和蛋白的link加长看能不能暴露在外面。

发自小木虫Android客户端
3楼2018-09-04 12:23:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allegory

禁虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2018-09-04 16:52:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yougu1314

禁虫 (小有名气)

送红花一朵
本帖内容被屏蔽

5楼2018-09-05 15:14:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泡沫12

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
可以试一下GST标签的载体

发自小木虫IOS客户端
6楼2018-09-06 21:20:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maoniuniu

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
His标签纯化和阴离子交换柱原理不同,不可同时比较。如果是His标签WB检测正确表达,且上清中量很大,可溶性很高,同时纯化步骤有对照,排除了柱料失效的问题,确实可以考虑标签是否暴露充分的问题,但是如果是标签暴露不充分,理论上换别的标签也是同样的问题,GST和MBP这些标签可帮助蛋白折叠,提高可溶性,但无法解决标签暴露问题,可以考虑改变标签的融合位置,比如N或C,加长linker也是优先选择的方法,甚至在充分了解蛋白结构的前提下可考虑加在一级结构的内部。如果阴离子交换不挂柱,同样在排除前述问题后,包括你蛋白表达没问题,你柱子没问题,那么要考虑使用的阴离子柱类型是否合适,这种纯化方式与你的标签暴露与否没有太直接的关系

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2018-09-07 09:55:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maoniuniu

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
对了,像楼上说重折叠也是可以的,即在尿素或盐酸胍变性的前提下进行纯化,GE的镍柱都是支持变性条件下纯化的,但是这种纯化方式不推荐优先选择,实在没办法才会去做,因为变性后的复性是个很麻烦的事,除非你不需要有活性的蛋白,可以不用考虑复性,只要可溶就行。另,硫酸铵沉淀一般用在最开始对目标蛋白进行粗分离,粗沉淀,最后仍然是绕不开后续亲和纯化的

发自小木虫Android客户端
8楼2018-09-07 10:01:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gfc7758

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

9楼2018-09-07 16:27:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yougu1314

禁虫 (小有名气)

送红花一朵
本帖内容被屏蔽

10楼2018-09-07 22:28:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yougu1314 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 8/400 2026-05-24 11:58 by 晓晓爱翠翠
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见