| 查看: 1040 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求教各位大神，黑色素肿瘤原代细胞培养用什么方法比较好？？
|
||
|
最近在做肿瘤细胞原代培养，想从黑色素肿瘤小鼠模型中，分离出肿瘤细胞进行培养。。用酶消化 和直接切碎肿瘤组织培养，都不太顺利。。请问各位大神，哪个步骤错了？ 有没有更好的方式来得到细胞。 1： 酶消化， 先把肿瘤组织取下后，分离肿瘤组织，并切成1立方毫米左右的小块，然后加入collagenase I + 30mg/ml DNase 在37度浮箱里消化1个小时。 然后加入有血清的培养基中止消化，用200目的滤网过滤， 离心（1000r/5min），弃上清，用PBS洗一次后，在离心，然后加入 1640培养基+10%血清+2% PBS，放入培养箱培养。 2: 直接组织块培养 把肿瘤组织取下后，分离肿瘤细胞，切成1立方毫米左右的小块，分散的放入 有1640培养基+10%血清+2% PBS的培养瓶中，放入培养箱中培养。 第一种方式，有得时候能得到肿瘤细胞，但是过几天，肿瘤细胞就不长了。 或者是直接污染掉了，第二种方式，得到细胞的数量也不太顺利。。 请问各位大神，有什么诀窍吗？或者你们用的什么方式来培养原代细胞呢？ 先谢谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
26申博求助-大型海藻养殖及抗逆机制研究
已经有23人回复
-
一区文章接收了，感谢，继续努力
已经有58人回复
-
口腔颅颌面科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有170人回复
-
PTK7抗体一直偶联不上弹头 求各位大神帮帮忙
已经有1人回复
-
一志愿苏大105500初试343求调剂
已经有3人回复
4楼2018-08-29 06:51:03
lsxx
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1168.8
- 红花: 8
- 帖子: 112
- 在线: 142.1小时
- 虫号: 1842661
- 注册: 2012-06-01
- 性别: MM
- 专业: 细胞死亡
3楼2018-08-27 13:06:51
5楼2018-08-29 16:24:52
20