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robot551

金虫 (正式写手)

[交流] 求救:新配的考马斯亮蓝溶液咋呈深蓝色?

用考马斯亮蓝G-250法测蛋白质浓度,正常的考马斯亮蓝溶液是棕褐色,与蛋白质作用后显蓝色,但我配出来的考马斯亮蓝溶液却是蓝色的,根本不能用。
我把容量器和试剂瓶等重新洗了一遍,再配制仍然如此。我的配方及配制方法都是正确的。考马斯亮蓝G-250 100mg先溶于50mL95%乙醇中,加100毫升85%磷酸,去离子水稀释到1升
在百度和google里查了下,有的说可能的原因是器皿被蛋白质污染了,但我觉得这种可能性不大。
不知何故,实验因此而停下来了。求救于各位虫子帮忙分析分析,有没有遇到过同样的问题,是什么原因导致的,怎么解决这个问题??
谢谢了,急啊!!

[ Last edited by robot551 on 2009-4-4 at 08:46 ]
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无效神

金虫 (小有名气)


robot551(金币+1,VIP+0):用R250+酒精+磷酸配出来的是深蓝色?谢谢仁兄的提醒~ 4-4 08:44
在检查一下你的考马斯亮蓝是G250还是R250,这两种用处不同,G250是测蛋白浓度的,而R250是做电泳时染色的,配出来是蓝色的很可能就是r250
无所谓
12楼2009-04-03 16:37:27
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查看全部 18 个回答

我是我2082

木虫 (职业作家)


robot551(金币+1,VIP+0):我已经百度和GOOGLE了,这个我看到过。不是问题所在,谢谢关注 4-2 21:14
我在Google上找到的,你可以照下面的试试下,看还有没有你所描述的情况

染色液配制: 1 mol/ L 盐酸溶液(A) ,1 g/ L CBB G250 溶液(B) ; 应用时用1 ml A 液和15 ml B 液混合加水至1 L , 搅拌混匀。

注意,关键所在是应用的时候再混合,不要配好等着染色。
2楼2009-04-02 20:47:50
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

是不是说Bradford方法?一般这个溶液都是买现成的,然后稀释
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-04-02 21:18:19
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robot551

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2009-4-2 21:18:
是不是说Bradford方法?一般这个溶液都是买现成的,然后稀释

就是Bradford法,能买现成当然最好了,只是现在要自己配制。
以前经常用这种方法,只是这次出问题了。
我们微笑,想念,咫尺天涯……
4楼2009-04-02 21:28:37
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