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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » primer5设计引物问题
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qibowen123

新虫 (小有名气)

[求助] primer5设计引物问题 已有1人参与

小白最近刚刚开始学习分子生物学。我的目的是把目的基因从模板里扩增出来
我在百度里查引物设计，推荐酮primer5这个软件，然是我按照步骤把!！目的基因!！输入进去后，serch结果发现，引物都是在基因的中间。
按道理，5’端的引物不是在目的基因的前段，3’在反向互补后的前端吗？ 为什么primer5这个软件设计的引物位置不对呢。
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1楼 2018-07-14 14:14:55
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cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+3, 鼓励交流 2018-07-17 08:57:04
primer5设计引物时有目的片段大小一栏需要填上，包括上下游引物的位置什么的，如果你的目的只要含目标基因序列就行，那你在primer5输入的基因序列可以比目标序列长点，如果只要目标序列，不能加减碱基，那你直接卡两端就行了，只需要在primer5上看一下TM值、GC含量等等，以上个人经验。。。
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2楼2018-07-16 15:54:04
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)
西门吹雪170: 屏蔽内容 2018-08-12 09:09:02
本帖内容被屏蔽
3楼2018-07-26 17:08:45
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汐尔于

新虫 (正式写手)
你知道目的基因序列了，就可以自己设计引物

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4楼2018-08-11 16:47:05
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刚刚好–

新虫 (初入文坛)
你用primer5这个软件设计引物，就必须先去NCBI网上去找目的基因的序列，再把你找到的序列粘贴去primer5软件设计你所需要的引物

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5楼2018-08-31 20:04:58
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昵称为昵称

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2018-09-01 00:18:16
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我最爱的雪维

新虫 (小有名气)
核酸序列只有基因不行，两边序列要加上，引物在两边序列内设计。

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7楼2018-10-26 18:47:51
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大猪佩驴

新虫 (初入文坛)
内容已删除
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8楼2019-04-01 21:22:30
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