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野野野花

新虫 (初入文坛)

[交流] 土壤细菌荧光定量pcr内参基因 已有1人参与

新手小白问一下土壤细菌荧光定量pcr内参基因用什么?做一些硝化反硝化细菌和氨氧化细菌的荧光,师兄说用16s,这个内参怎么获得?直接去公司买吗?

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cventbio

新虫 (初入文坛)


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荧光定量 分为探针法和染料法,
你应该选的是染料法吧?
16s的引物获得:途径1,文献参考,确定的样品数据什么菌,对应查阅文献,应该能有16s引物序列。然后找公司合成引物。当然你的目的基因基本也是如此获得引物序列。
途径二,对应菌的序列到数据库取找 ,找到16s的保守序列并用软件对应设备引物。获得的引物合成后做预实验 验证:体系?有无而具体,扩增效率等。目的基因也是如此这般。
www.cventbio.com 荧光定量、无缝链接、单克隆......
2楼2018-06-21 17:03:33
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