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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 模式生物 » Tair 上购买的突变体 用LP RP LBB都没有条带 确认DNA没有问题 求大神指教！！
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深蓝小米米

金虫 (正式写手)

[求助] Tair 上购买的突变体 用LP RP LBB都没有条带 确认DNA没有问题 求大神指教！！已有1人参与

Tair 上购买的突变体 用LP RP LBB都没有条带 确认DNA没有问题 求大神指教
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纷纷万事，直道而行。纵有疾风起，人生不言弃。
1楼2018-06-07 10:01:42
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
引物设计的有问题，重新设计引物或者看看有没有文章用过这个突变体，直接用文章里的引物。
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深蓝小米米
。
2楼2018-06-11 14:24:38
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深蓝小米米

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2018-06-11 14:24:38
引物设计的有问题，重新设计引物或者看看有没有文章用过这个突变体，直接用文章里的引物。

好吧，谢谢。

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纷纷万事，直道而行。纵有疾风起，人生不言弃。
3楼2018-06-12 11:27:21
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更深的蓝888

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

模板Col与H2O对照呢？
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天若有情天亦老
4楼2018-06-13 18:45:48
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深蓝小米米

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 更深的蓝888 at 2018-06-13 18:45:48
模板Col与H2O对照呢？

不太明白？什么意思？
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纷纷万事，直道而行。纵有疾风起，人生不言弃。
5楼2018-06-19 21:20:28
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 深蓝小米米 at 2018-06-19 21:20:28
不太明白？什么意思？...

意思是用你的LP+RP引物跑下野生型模板，如果能出条带，说明这对引物没有问题。你跑的引物是三条放在一起扩增没有得到条带，还是LP+RP  BP+RP两对分别扩增没有条带，如果是前者，那就分别扩增看看结果。分别扩增做个野生型扩增做阳性对照，如果LP+RP引物都跑不出来，要么引物不行，要么就是扩增条件没有设置好，你自己摸索下。
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深蓝小米米
。
6楼2018-06-21 02:50:14
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SunRuikang

新虫 (小有名气)
楼主是直接从tair上买的么？听说过海关很麻烦，楼主遇到了吗？

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7楼2018-06-21 12:52:07
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深蓝小米米

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by SunRuikang at 2018-06-21 12:52:07
楼主是直接从tair上买的么？听说过海关很麻烦，楼主遇到了吗？

是的 TAIR 买的 课题组之前申请的账号  坦白讲买的少几管是没有问题的 但是买的多了就会被扣下 从海关放行需要开Tair那边开非转基因证明 可是明明是转基因的 所以上次买的有点多30几管就全被扣了 再以后就每次买4-6管 再多买一个PSC 就能收到货。
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纷纷万事，直道而行。纵有疾风起，人生不言弃。
8楼2018-06-21 21:08:08
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深蓝小米米

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2018-06-21 02:50:14
意思是用你的LP+RP引物跑下野生型模板，如果能出条带，说明这对引物没有问题。你跑的引物是三条放在一起扩增没有得到条带，还是LP+RP  BP+RP两对分别扩增没有条带，如果是前者，那就分别扩增看看结果。分别扩增做个 ...

我是分别扩增的，感谢意见。
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纷纷万事，直道而行。纵有疾风起，人生不言弃。
9楼2018-06-21 21:08:48
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今夏有风

新虫 (小有名气)
确认下引物有没有问题，退火温度合适吗。有阳性对照吗？

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10楼2018-07-22 12:48:45
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