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临床与分析

新虫 (初入文坛)


★
gcwang(金币+1): 谢谢参与
这是因为全多孔球形硅胶柱上的非特异吸附位点对多肽产生死吸附从而导致不出峰。

色谱柱中非特异性吸附位点主要来源于残留的硅醇基、硅胶中的残留重金属、键合相脱落后暴露的硅羟基,柱管内壁没有被钝化的位点。这些都会对多肽样品有较强的非特异性吸附。

其实在开始使用新色谱柱时,对生物样品这样的非特异性吸附会比较严重,可以对色谱柱进行高浓度样品饱和处理。在正式检测前预先进样,使样品在柱子上累积,覆盖住这样的位点,才会使我们以后的分析有好的色谱图。建议隔一分钟进一次样,连续进十几针,用过量样品覆盖掉非特异性吸附位点。等峰面积,峰形稳定后就可以正式检测样品。

可以加吐温或者BSA

END

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51楼2021-11-27 10:28:25
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