24小时热门版块排行榜    

查看: 678  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mouquo

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR

请问用质粒或者PCR产物做模板,为什么p出的带会很浅,退火温度还是和原来一样

@gyesang 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mouquo

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bo娜娜 at 2018-05-30 23:32:55
很多原因。特异性酶的酶活性不好。做pcr时,管子内不能有气泡,气泡也会导致这个现象。还有可能是胶的原因,如果marker同样很浅,说明胶有问题。还有一种是操作上的误差。
...

但用的KOD Fx,扩增效率应该很好,同样的基因,也就引物不同,改了酶切位点,操作我觉得不会差那么远吧

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-05-31 00:01:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

bo娜娜

新虫 (初入文坛)

很多原因。特异性酶的酶活性不好。做pcr时,管子内不能有气泡,气泡也会导致这个现象。还有可能是胶的原因,如果marker同样很浅,说明胶有问题。还有一种是操作上的误差。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-05-30 23:32:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bo娜娜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mouquo at 2018-05-31 00:01:22
但用的KOD Fx,扩增效率应该很好,同样的基因,也就引物不同,改了酶切位点,操作我觉得不会差那么远吧
...

回想一下p之前有没有赶掉管子里面的气泡,因为pcr仪是根据光学性质来检测的。如果有气泡,影响还是挺大的

发自小木虫Android客户端
4楼2018-05-31 00:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 70/3500 2026-08-16 08:29 by 医学老男孩
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见