【答案】应助回帖

11楼2018-05-16 17:11:38

wx1308897716

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11楼: Originally posted by maoniuniu at 2018-05-16 17:11:38
惭愧，很少回答问题。

4 K 左右的片段一般来说并不长，如果扩不出来，可以从以下几个方面或策略考虑：

（1）普通PCR策略：因为给的信息很少，可以从以下几个方面依次考虑改善，第一，引物设计是否合适，可以适 ...

非常感谢你的回答，很详细，谢谢

12楼2018-05-17 10:54:27

zhouxueysq

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我们当初是做重叠PCR，P出来的

13楼2018-05-28 13:03:10

Rose56882

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巢式pcr试试呢

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14楼2018-09-10 18:23:15

LBXMC

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9楼: Originally posted by A913162220 at 2018-05-16 16:09:23
这么小，我6600bp都可以扩出来得。应该考虑模板问题，看看基因表达模式。

您好，那请问扩出来之后您怎么送测的呢，PMD-19T连接转化吗？我的片段约5000bp,连上了，但是挑单送测后，测序结果很奇怪，4个克隆子都有不同程度的片段缺失（各一千多，缺失位置也不一样），非常奇怪，测序公司说是我片段太长的问题，可是已经连上了，应该就没有问题吧，现在特别愁，请问您能否给点建议呢？非常感谢您！qq:1277807576, 如果方便，欢迎您联系我！

Nothing is impossible!

15楼2019-05-08 09:52:04

LBXMC

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各位，想向大家请教一个相关问题：
我的片段五千多，是P出来，条带也单一，但就是连接、挑单、测序后，四个菌样有不同程度的缺失（少一千多，且位置不一样），测序公司说是我序列太长的原因，可是不应该啊，我觉得连上了应该就没有问题的，非常困扰头疼...载体用的PMD19T.请问您是怎么测序的啊，请求回复，非常感谢！

Nothing is impossible!

16楼2019-05-08 10:15:22

金平果

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工程大，分段慢慢来

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17楼2019-08-17 13:28:24