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夜微凉zj

新虫 (小有名气)

[求助] PCR后为什么条带总是呈现“w”形状?

正在做大果榆ITS序列的引物筛选与PCR体系优化，在做温度梯度时扩增出来的条带总是呈“w”形状是什么原因呀？用的2％浓度的琼脂糖凝胶，恒压120V，同一块胶上单拷贝跑出来的条带是清晰的直线状。这是为什么呀？一直找不到原因，求大神指点

@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2018-05-12 22:40:17
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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者
考虑一下温度的影响

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有时一本正经，有时胡言乱语。
3楼2018-05-13 09:52:13
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夜微凉zj

新虫 (小有名气)
电泳缓冲液是1×TBE
凝胶配方:1.2g琼脂糖，60ml 1×TBE溶液

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2楼2018-05-12 22:43:23
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夜微凉zj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by still2008 at 2018-05-13 09:52:13
考虑一下温度的影响

嗯嗯 做的温度梯度 结果所有条带都是w形的

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4楼2018-05-14 08:17:51
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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夜微凉zj at 2018-05-14 08:17:51
嗯嗯 做的温度梯度 结果所有条带都是w形的
...

考虑电泳时板子温度是否差异很大

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有时一本正经，有时胡言乱语。
5楼2018-05-15 06:50:31
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