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xmchh123456

新虫 (小有名气)

[求助] qPCR引物筛选

新手求教,请问荧光定量pcr如何进行引物筛选实验?体系是多少,是用设计的引物进行正常pcr后看电泳结果是否有杂带吗,只跑出一条目的条带是不是就说明这条引物可以用于荧光定量实验?加96孔板前要进行预实验荧光检测吗,怎么进行检测呢?谢谢!

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xmchh123456

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by wukangming at 2018-05-13 00:00:27
体系试剂什么都是一样的。引物也不用筛选,直接在oligo或者PP5上设计出来给外面公司合成就行(赛默飞就很纯,完全不用担心有杂质)。引物一般是粉末状给你的,建议你先把这个引物稀释到适合浓度,然后去跑电泳 ...

就是设计好引物然后直接扩增跑电泳,如果检测只有一条目的条带就可以直接拿来这对引物来做荧光定量了是吧?荧光定量结果只要R方大于0.99,没有双峰就说明这次荧光定量实验结果能用是吗

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8楼2018-05-13 10:19:52
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star013

新虫 (知名作家)


2楼2018-05-12 19:47:11
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wxm0212

新虫 (正式写手)

我觉得吧,还是看一些想关文献吧

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3楼2018-05-12 20:50:13
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xmchh123456

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wxm0212 at 2018-05-12 20:50:13
我觉得吧,还是看一些想关文献吧

文献没有具体说明怎么做,也有可能是没查到,所以想通过论坛请教已做过的高手指点

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4楼2018-05-12 21:09:53
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