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[求助]
qPCR引物筛选
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新手求教，请问荧光定量pcr如何进行引物筛选实验？体系是多少，是用设计的引物进行正常pcr后看电泳结果是否有杂带吗，只跑出一条目的条带是不是就说明这条引物可以用于荧光定量实验？加96孔板前要进行预实验荧光检测吗，怎么进行检测呢？谢谢！ 发自小木虫Android客户端 |
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wukangming
银虫 (小有名气)
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 体系试剂什么都是一样的。引物也不用筛选，直接在oligo或者PP5上设计出来给外面公司合成就行（赛默飞就很纯，完全不用担心有杂质）。引物一般是粉末状给你的，建议你先把这个引物稀释到适合浓度，然后去跑电泳，如果是一条带就基本说明引物没问题。做不出来一般都是你实验操作和环境问题，引物的筛选如果你找个好公司的话完全可以偷下懒。可以设置一个阴性对照、阳性对照，可以分别看看是不是环境污染或是实验步骤出错。扩增效率没问题情况是90%-110% R值最好>0.99 http://www.doc88.com/p-9955632672617.html |
xmchh123456
7楼2018-05-13 00:00:27
star013 
新虫 (知名作家)
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