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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【在线交流分析方法】急急急，有奖请高手指点大极性东西的分离
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lgs4464

木虫 (正式写手)

[交流] 【在线交流分析方法】急急急，有奖请高手指点大极性东西的分离

我是一名做合成的研究生，现在要测20个衍生物的半衰期。无奈，分析方法难以建立，现在请分析高手给我以指点。金币酬谢。

先介绍一下背景。衍生物是一个核苷类似物，大家都知道核苷是大极性的。要测的衍生物结构中含有两个羟基，一个嘧啶环，还有一个脒基。降解后的产物含有两个羟基，一个嘧啶环一个氨基，极性比目标衍生物大很多，在tlc上用二氯甲烷：甲醇=5：1能展开0.5。

我的条件：C18反相柱，
1. 甲醇水和我的衍生物反应，在柱子上会降解，更不用说峰形什么的了
2.将甲醇换为乙腈，峰形很差（化合物偏碱性）
3.将乙腈和水中分别加入0.1%的三氟醋酸后，峰形好很多
4.问题出在衍生物和降解产物的保留时间一直一样，我用标样分别进柱子，永远都一样，通过调节流动相乙腈和水的比例不能分开，而且保留时间都不变，为1.2min。

焦头烂额中，要靠这些数据准备六月份的毕业论文。

我想请问，分析高手有没有好的建议

目前实验室条件：有一根反相柱C18（4.6×150mm）；还有一根柱子是ZORBAX Rx-sil （4.6×250mm），这根柱子用的不多，不知道怎么用，用过异丙醇正己烷，也用过甲醇水。有高手能否介绍一下该柱子

我希望高手能指点我该怎么改善分析条件，把衍生物和降解产物分开。
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执子之手，与子偕老
1楼 2009-03-22 19:52:50
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lgs4464

木虫 (正式写手)
原来可以走纯水的，我还害怕柱压过大呢

我现在总算知道了，分析化学要靠经验，也要靠尝试。我是初级，只要分开就好。分析专业的牛人目标是分开且峰形漂亮。哈哈
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执子之手，与子偕老
9楼2009-03-23 15:55:43
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab
ZORBAX Rx-SIL
.由高纯度（大于99.995%）多孔硅胶微球制成（孔径是固体硅胶微球之间的空隙）
.比其它类型硅胶更坚固
.比ZORBAX-SIL酸性更低、金属含量更少
.低酸度、低金属量使ZORBAX　Rx-SIL非常适合极性化合物的正相分离，特别是那些在偏酸性硅胶上峰形不对称的化合物
.可用于强亲水化合物用高有机流动相以反模式分离
也就是说根据以上的结果你用它可以采用正相的方法进行分离啊，但一般来说正相的方法的选择性更低些，所以你用这样的柱子不一定能分开啊，但如果用反相柱子的话，我想分离的可能性更大些，建议你还用你的C18柱子，把流动相加些缓冲盐进入，但具体的方法还要看你的分子的结构才行，如果有兴趣可以把你的结构式贴出来，也许我能帮上忙 啊。
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3楼2009-03-23 12:22:40
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qianyiwanyi

金虫 (小有名气)
★ ★
jsys(金币+2):感谢应助！
用ZORBAX Rx-sil （4.6×250mm）这根柱子试一下亲水模式分离，就用水跟乙腈做流动相，水相比在20%以内吧，试下吧，估计会有效果~
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4楼2009-03-23 13:27:53
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youarebeloved

金虫 (著名写手)
★ ★
jsys(金币+2):感谢应助！
2.将甲醇换为乙腈，峰形很差（化合物偏碱性）
3.将乙腈和水中分别加入0.1%的三氟醋酸后，峰形好很多
4.问题出在衍生物和降解产物的保留时间一直一样，我用标样分别进柱子，永远都一样，通过调节流动相乙腈和水的比例不能分开，而且保留时间都不变，为1.2min。

有几点不清楚：为什么待测物质呈碱性，确加酸性调节剂，而且峰形变好，一般碱性物质不时加入碱性调节剂
即使极性再强，再难分离的物质，调节流动相比例保留时间应该产生变化，一点不变是不符合常理的。
1.2min这个保留时间太小，说明待测物几乎没有保留，你的流动相乙腈：水比例调到什么程度，根据现象，流动相相对于待测物来说极性太弱。
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5楼2009-03-23 15:04:29
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