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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lhb2990

专家顾问

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[交流] 请教MTT

我在文献上也看到了DMSO占0.1%,但200微升的话里面只能有0.2微升的DMSO,我的样品在这么小的体积里溶不了,请教一下除了加DMSO是不是还加了生理盐水?多谢!
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feixiang1788

专家顾问

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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢! 3-22 21:29
我们现在正在做细胞,不知你是不是。
我们加DMSO是在反应结束前加MTT然后直接加200ul,效果不错
不知是否对你有用
2楼2009-03-22 11:25:57
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zouqin8091

超级版主

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MTT原理及方法


lwf991229(金币+1,VIP+0):辛苦~ 3-23 10:00
DMSO是最后用于溶解结晶的,直接用,不用配成溶液啊

MTT原理:
四唑盐(MTT)比色试验的原理是:活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中,而死亡细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联免疫检测仪在570nm处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。

MTT实验方法:
细胞去掉原有培养基→ 加入1ml新鲜F12培养基 →加入40ulMTT→培养箱中孵育3.5-4h → 吸弃上层液体→ 加入450µLDMSO → 振摇5min → 培养箱中放置30min → 振摇5min → 将紫色溶液加入96孔板(150µL/孔)→ 570nm处测定其光吸收值
3楼2009-03-23 09:20:26
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lhb2990

兑换贵宾

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MTT

可能是我没说清楚,我的样品也是用DMSO溶解,我已经知道该怎么做了,不过还是很感谢各位虫友的帮助!
4楼2009-03-23 23:04:51
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ylsyouni65

实习版主

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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 4-6 23:51
easy ,你把加药的浓度 加大就行了~减少加药体积不就OK了
希望我没理解错
5楼2009-04-06 09:34:31
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tjegg

专家顾问

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现在出了MTT的升级产品MTS,没有这么复杂了。不需要DMSO溶解了。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
6楼2009-04-06 21:03:38
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xiaoqin_81

专家顾问

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题我也正在困惑 顶起! 今天登陆木虫 正是为了解决这个困惑  不知LZ解决这个问题了没?
7楼2009-05-31 22:31:40
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xiaoqin_81

管理员

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
LZ 的意思是  样品(浸膏或者其他粉末)用DMSO溶解制成母液 ,使用时,吸取一定溶液 加入到培养基,用培养基稀释成梯度浓度  再将之用来培养细胞  因为DMSO对细胞有毒性  所以其在培养液中的浓度要小于 0.1%  我的药物能溶部分  但不能全融    期待回复
8楼2009-05-31 22:37:23
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zmjcpu

版主

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我还没遇到这个问题,但是在做MTT,有其它问题,以后大家可以一起讨论,共同进步。
9楼2009-06-03 14:15:01
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fwtfu

超级版主

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
药物用DMSO溶解制成母液 ,使用时,用无血清培养稀释至所需浓度,再将之用来培养细胞  DMSO在培养液中的浓度要小于 0.3%
10楼2009-06-06 20:17:50
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