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唯念念念

新虫 (初入文坛)

[交流] crispr基因编辑鉴定是否敲除

最近在做敲除,设计了四个靶点,转基因苗比较多,但是扩增靶点序列测序,序列没有变化,是真的没敲掉吗?共有两个基因,都是这样的情况,还有基因比较序列是不是只在NGG上游有变化,下游序列的替换是不是不能说敲掉了?急!急!急!谢谢!谢谢!谢谢!

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无金易主

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 唯念念念 at 2018-04-15 22:22:08
没有测序怎么确定序列的变化呢
...

直接PCR验证只有同源臂的大小,中间的目的基因已经没有了

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12楼2018-04-15 22:47:27
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唯念念念

新虫 (初入文坛)

有没有人知道的,急!急!急!

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2楼2018-04-15 17:47:48
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无金易主

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 唯念念念 at 2018-04-15 17:47:48
有没有人知道的,急!急!急!

那就是没敲掉

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3楼2018-04-15 19:42:49
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无金易主

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无金易主 at 2018-04-15 19:42:49
那就是没敲掉
...

我已经敲掉一个基因,但是第二个从开始就敲不掉很奇怪

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4楼2018-04-15 19:43:50
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