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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR产物条带弥散
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whlz630

金虫 (正式写手)

[交流] PCR产物条带弥散

PCR产物跑胶条带弥散，如下图，请各位高手指点：
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1楼 2009-03-19 13:28:04
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)
胶密度不均一？冷却时间过短，电压不稳？
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2楼2009-03-19 14:42:35
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花的泪

银虫 (初入文坛)
很可能是胶做的不好，建议重新做胶
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3楼2009-03-19 15:07:34
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
光看marker其实还好，所以不是胶或者电泳的问题
怀疑模板量太大
还有酶活力降低了
要不然就是引物实在没设计好
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4楼2009-03-19 16:15:32
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fz-xyz

银虫 (小有名气)
弱弱的问一下，哪条是PCR产物的？
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追求科学
5楼2009-03-19 16:45:22
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fz-xyz

银虫 (小有名气)
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP浓度过高，Mg2 浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2 浓度。④增加模板量，减少循环次数。
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追求科学
6楼2009-03-19 16:56:26
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wangtengxu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by fz-xyz at 2009-3-19 16:56:
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差，dNTP浓度过高，Mg2 浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。 ...

同意
另外胶做的也不好 可以适当增大浓度
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想和有趣的人一起做有趣的事。
7楼2009-03-20 15:37:40
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
我认为主要还是胶和电泳仪的问题，加样口里还亮呢
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
8楼2009-03-21 13:49:33
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