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whlz630

金虫 (正式写手)

[交流] PCR产物条带弥散

PCR产物跑胶条带弥散,如下图,请各位高手指点:
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

胶密度不均一?冷却时间过短,电压不稳?
2楼2009-03-19 14:42:35
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花的泪

银虫 (初入文坛)

很可能是胶做的不好,建议重新做胶
3楼2009-03-19 15:07:34
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

光看marker其实还好,所以不是胶或者电泳的问题
怀疑模板量太大
还有酶活力降低了
要不然就是引物实在没设计好
4楼2009-03-19 16:15:32
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fz-xyz

银虫 (小有名气)

弱弱的问一下,哪条是PCR产物的?
追求科学
5楼2009-03-19 16:45:22
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fz-xyz

银虫 (小有名气)

PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差,dNTP浓度过高,Mg2 浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:①减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2 浓度。④增加模板量,减少循环次数。
追求科学
6楼2009-03-19 16:56:26
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wangtengxu

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by fz-xyz at 2009-3-19 16:56:
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差,dNTP浓度过高,Mg2 浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:①减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。 ...

同意
另外胶做的也不好 可以适当增大浓度
想和有趣的人一起做有趣的事。
7楼2009-03-20 15:37:40
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

我认为主要还是胶和电泳仪的问题,加样口里还亮呢
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
8楼2009-03-21 13:49:33
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