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glucifer

金虫 (小有名气)

[交流] 葡聚糖凝胶LH20 该怎么预处理?

各位高手们,现在手头上有些葡聚糖LH20,想用来分离那些点板已经是一条线的混合物了,而且能溶于95%的乙醇水溶液。请教一下,我该怎么预处理葡聚糖LH20呢?
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xiangqiuli

金虫 (初入文坛)

★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~! 3-18 11:58
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 3-18 16:15
葡聚糖凝胶LH-20使用说明

产品        LH-20
分离范围(球蛋白)        100-4000
颗粒大小(μm)        20-150
特性/应用        胆固醇,脂肪酸,激素,维他命,天然产物
PH稳定性        2-13
最高流速(cm/h)        500
适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济的大规模制备各种天然产物,尤其在中药有效成分提取中作为大孔吸附树脂解析物的纯化。
结合凝胶过滤﹑分配色谱及吸附层析于一身,能分离结构相近的分子。因此使用中要考略几种色谱的作用机制。
最高载量可达250mg样品/ml凝胶﹑极少需要再生﹑使用得当,分离效果可保持不变。
上样量视被分离物的结构性能的差异而定-差异大,可大;差异小,应小。
凝胶过滤的上样量一般为6-8%的床体积,我们建议初次上样量控制在3%的床体积,视分离情况可以逐步增加;柱高的选择也与分离要求相关――难分物质要有一定柱高和流速控制;流动相可参考TLC的条件,正确的流动相可以提高分离度并缩短分离时间。(见附表“溶剂混溶性”)
流动相的常用溶剂为:
水  甲醇  丙酮  乙酸乙酯   二氯甲烷
上述溶剂的极性依次降低,对带有极性的被分离物而言,保留值和分离度依次递增;同理选用的凝胶柱高可依次降低,流速可以增大(或上样量可以增加)。
使用方法:将干粉浸泡于60—70%乙醇中过夜(充分搅拌),洗去可能存在的残留物,抽干然后湿态装柱,动态用一倍柱体积的60—70%乙醇淋洗,再用水洗净乙醇即根据自己选用的流动相体系平衡、上样
LH-20在不同溶剂中的溶胀性能:
溶剂        溶胀体积ml/g干胶        溶剂        溶胀体积ml/g干胶
二甲亚砜        4.2-4.4        乙醇        3.2-3.6
吡啶        4.0-4.3        异丙醇        3.1-3.5
水        3.8-4.2        四氢呋喃        3.1-3.5
甲醇        3.7-4.2        二氯乙烷        3.5-4.0
丙醇        3.4-3.8        甲苯        1.5-1.6
2楼2009-03-18 10:06:27
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