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305810692

金虫 (正式写手)
呵呵 如果菌种本身不稳定易变异退化的话，也不适宜做工程菌的，反复的筛选和复壮多麻烦啊
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11楼2009-03-18 09:20:41
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canghaiyili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yqhc at 2009-3-17 22:00:
出现此种现象是正常的
原因有多种：
再次验证实验原料带来的差异（包括水，原料试剂批次等）
菌种不稳定在保藏过程中产醇能力降低
保藏不当

建议：
将现有菌种重新筛选】
从原来筛选出的地方再次筛选
做 ...

还有好的建议吗？
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记住该记住的，忘记该忘记的。改变能改变的，接受不能接受的。
12楼2009-03-18 14:13:42
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canghaiyili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 305810692 at 2009-3-18 09:20:
呵呵 如果菌种本身不稳定易变异退化的话，也不适宜做工程菌的，反复的筛选和复壮多麻烦啊

是呀，自然菌种的话没有这么大的变化吧？
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记住该记住的，忘记该忘记的。改变能改变的，接受不能接受的。
13楼2009-03-18 14:14:31
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那片碧海蓝天

铁杆木虫 (正式写手)

金世纪
是不是年前检测有问题啊,自然筛选的菌种不可能出现那么大的波动,10倍啊....?我估计是你前面检测有问题,一筛选就能筛选出高10倍的菌种很难以相信......,因为你条件都没改变嘛,在菌种保证没有被污染的情况下,自然退化是没那么快的......
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谦虚谨慎!
14楼2009-03-18 15:32:06
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canghaiyili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 那片碧海蓝天 at 2009-3-18 15:32:
是不是年前检测有问题啊,自然筛选的菌种不可能出现那么大的波动,10倍啊....?我估计是你前面检测有问题,一筛选就能筛选出高10倍的菌种很难以相信......,因为你条件都没改变嘛,在菌种保证没有被污染的情况下,自然退 ...

对的，从400株筛到的，筛选了半年呢
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记住该记住的，忘记该忘记的。改变能改变的，接受不能接受的。
15楼2009-03-18 15:42:37
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yinleidawn

铜虫 (初入文坛)
确实是退化，我这里的菌种也出现过这种现象，鉴定后发现退化很厉害。。
重新复壮吧。
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16楼2009-03-18 16:16:42
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canghaiyili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yinleidawn at 2009-3-18 16:16:
确实是退化，我这里的菌种也出现过这种现象，鉴定后发现退化很厉害。。
重新复壮吧。

那该怎么复壮呢？
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记住该记住的，忘记该忘记的。改变能改变的，接受不能接受的。
17楼2009-03-18 19:16:34
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
canghaiyili(金币+8,VIP+0):谢谢！比较详细，我只能一点点试试了 3-19 13:18
菌种的复壮



（一）复壮

从菌种衰退的本质可以看出，通常在已衰退的菌种中存在有一定数量尚未衰退的个体。

狭义的复壮是指在菌种已经发生衰退的情况下，通过纯种分离和测定典型性状、生产性能等指标，从已衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体，以达到恢复原菌株固有性状的相应措施。

广义的复壮是指在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前，就经常有意识地采取纯种分离和生产性状测定工作，以期从中选择到自发的正突变个体。

由此可见，狭义的复壮是一种消极的措施，而广义的复壮是一种积极的措施，也是目前工业生产中积极提倡的措施。

（二）菌种复壮的主要方法

1. 纯种分离法

通过纯种分离,可将衰退菌种细胞群体中一部分仍保持原有典型性状的单细胞分离出来,经扩大培养,就可恢复原菌株的典型性状。常用的分离纯化的方法可归纳成两类：一类较粗放，只能达到“菌落纯”的水平，即从种的水平来说是纯的。例如采用稀释平板法、涂布平板法、平板划线法等方法获得单菌落。另一类是较精细的单细胞或单孢子分离方法。它可以达到“细胞纯”即“菌株纯”的水平。后一类方法应用较广，种类很多，既有简单的利用培养皿或凹玻片等作分离室的方法，也有利用复杂的显微操纵器的纯种分离方法。对于不长孢子的丝状菌，则可用无菌小刀切取菌落边缘的菌丝尖端进行分离移植，也可用无菌毛细管截取菌丝尖端单细胞进行纯种分离。

2. 宿主体内复壮法

对于寄生性微生物的衰退菌株，可通过接种到相应昆虫或动植物宿主体内来提高菌株的毒性。例如，苏云金芽孢杆菌经过长期人工培养会发生毒力减退、杀虫率降低等现象，可用退化的菌株去感染菜青虫的幼虫，然后再从病死的虫体内重新分离典型菌株。如此反复多次，就可提高菌株的杀虫率。根瘤菌属经人工移接,结瘤固氮能力减退,将其回接到相应豆科宿主植物上,令其侵染结瘤,再从根瘤中分离出根瘤菌,其结瘤固氮性能就可恢复甚至提高。

3. 淘汰法

将衰退菌种进行一定的处理（如药物，低温、高温等），往往可以起到淘汰已衰退个体而达到复壮的目的。如有人曾将“5406”的分生孢子在低温(－10～30℃)下处理5～7d，使其死亡率达到80％，结果发现在抗低温的存活个体中留下了未退化的健壮个体。

4. 遗传育种法

即把退化的菌种，重新进行遗传育种，从中再选出高产而不易退化的稳定性较好的生产菌种
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18楼2009-03-18 20:04:21
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
复壮的判断方法：
1.生化指标:比如一些能够利用特殊物质作为生长必须物质的菌株，你可以通过其生活过程中某些中间代谢物的产量作为指标。或者是这个菌株产生的酶或者是这个菌株产生的次生代谢物。
2.生理指标：菌株如果复壮，那么他的生长量就会恢复到原来的水平或者更高，适合用于群体研究。
3.通过特殊的生化反应筛选出复壮的菌株：比如说你的菌株能够分解淀粉，那么你可以使用淀粉培养基进行培养，培养后通过碘液显色，粗略判断其是否复壮。
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19楼2009-03-18 20:05:07
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cyh2010

铁虫 (正式写手)
建议你看一下诸葛建编著的 《微生物学》那本书，里边有对复壮方法的描述。
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20楼2009-03-18 20:05:55
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