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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » cck8能用于做抗细菌活性的测试吗？请问原理是什么？
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xiecj

木虫 (著名写手)
为什么说可以用，这里需要强调的一点是，无论是CCK 还是mtt，它们一开始作用的是真核细胞的线粒体，而作为原核生物的细菌，自然是没有线粒体的，那么为什么又可以用呢？其实很简单，因为整一个细菌个体的一些特性与线粒体极为相似，因此可以采用

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11楼2018-04-04 15:05:33
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gallop_feel

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by xiecj at 2018-04-04 15:02:17
原理上没太大差别，但是好像没有文献支持用cck8，mtt倒是有不少文献支持
...

的确，当初也没找到用cck8.。。。没文献支持但也听一个师兄说用cck-8也没问题，现在就是不知道怎么跟导师说明而已（选用CCK-8而不是MTT）。
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12楼2018-04-06 20:29:14
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by gallop_feel at 2018-04-01 22:08:22
呃。。谢谢你的意见，但我想问的更多是cck8作用于细胞和作用于细菌的原理有什么不一样。因为试剂盒里面的都写明是细胞活性或者细胞增殖实验测试用的。...

我觉得，细胞跟细菌是有显著差别的。应该不一样，你可以试试看，我用MTT试过，我觉得不能做。
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13楼2018-04-08 11:12:54
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xiecj at 2018-04-04 15:01:26
不建议用DEAD/LIVE，首先得排除材料干扰，其次，PI和SYTO-9染料双染以后上CLSM拍照这些只是给半定量的结果，说句实在话，那就是你想要什么结果，都能拍出来
...

的确材料也能染上，也只能半定量，活性检测本身就只能半定量吧。染色都需要控制浓度，也需要适当的洗涤才行，cck8和MTT我都觉得不合适，用cck8可能重复性很差，干扰也比较多，很难获得确实的数据，MTT的准确性还不如cck8。而SYTO-9/PI法其实类似于细胞凋亡染色FDA/PI，都是半定量而已，但是显微镜可以直接观察。
传统来说，MTT和CCK8主要用来检测细胞活性，细菌的我也试过，真的重复性太差了，跟你用的培养基，生长状态，还有代谢产物，等等都有关系，很难表征细菌活性这个概念。
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14楼2018-04-09 09:22:38
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xiecj

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by snoopytbw at 2018-04-09 09:22:38
的确材料也能染上，也只能半定量，活性检测本身就只能半定量吧。染色都需要控制浓度，也需要适当的洗涤才行，cck8和MTT我都觉得不合适，用cck8可能重复性很差，干扰也比较多，很难获得确实的数据，MTT的准确性还不 ...

我们一直用MTT做的，涂板也对比过，基本上是一致的，我不清楚您为什么重复性很差，我们组用MTT也发过不错的文章了

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15楼2018-04-10 08:41:31
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by xiecj at 2018-04-10 08:41:31
我们一直用MTT做的，涂板也对比过，基本上是一致的，我不清楚您为什么重复性很差，我们组用MTT也发过不错的文章了
...

MTT太粗了，我觉得这个方法不值得推荐。微生物的培养物比细胞的复杂的多，且LDH这东西跟细菌的活性，概念差别有点大。个人觉得微生物活性不能单单用糖代谢来表征，跟细胞系统相比，微生物的代谢活动多元性较高，还存在生物膜这个概念，不能用单个细菌的活性来评估种群的活性。当然了，如果你的目标菌确定代谢活动主要通过异养，完全可以用MTT做。我不否认MTT的实验技术，只不过觉得不能把该方法推广到所有的微生物研究中去。
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16楼2018-04-10 09:11:16
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doudou2199

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

CCK-8溶液用来测细菌活性是没有问题的，我们课题组前段时间用的康赛德生物的CCK-8溶液，实验结果很好的，和测细胞活性一个原理
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17楼2022-11-07 17:53:08
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doudou2199

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by gallop_feel at 2018-04-06 20:29:14
的确，当初也没找到用cck8.。。。没文献支持但也听一个师兄说用cck-8也没问题，现在就是不知道怎么跟导师说明而已（选用CCK-8而不是MTT）。...

MTT步骤长，干扰因素多，肯定是不如CCK-8
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18楼2022-11-07 17:54:57
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