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15623507725新虫 (初入文坛)
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[求助]
Gibson连接和T4连接酶连接总是把不成功 已有1人参与
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| 目前在构建一个载体，用了两种方法：一个是Gibson连接，将骨架双酶切切开，然后将与骨架带有同源臂的片段用Gibson酶连接，然后再转化，菌落PCR验证出来的条带和我的目的条带总是不同，送去测序也不对；后来改用在连接片段前后加上酶切位点和保护碱基，转化出来的板一个菌落都没有。将片段送去测序也没有发现什么问题，感受态也没问题，这个实验反反复复做了快两个月了，就是没有进展。哪位大神能够给点思路，我号继续往下做。谢谢啦！@天使托 |
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9楼2019-04-04 15:15:28
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3楼2018-03-19 15:56:09
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4楼2018-03-19 16:08:24