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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】转化问题，急！
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zijing7391

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-3-18 00:00:
没连上……
你转一个环化的质粒看看

谢谢！
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11楼2009-03-18 17:29:32
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zijing7391

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zijing7391 at 2009-3-17 22:21:
转化的具体步骤：
1.将连接产物加入到100Ul的感受态细胞中，冰上放置30min
2.42度水浴60-90s
3.冰上放置1min
4.加入37度预热的培养基890ul
5.37度150转培养45分钟
6.取200UL涂平板，37度过夜培养
这是我的 ...

o(∩_∩)o...谢谢！我试试！
赞一下 回复此楼
12楼2009-03-18 17:30:15
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zijing7391

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by qiangfeng at 2009-3-18 12:21:
（1）从-70℃冰箱中取出大肠杆菌DH5α感受态，置冰上备用;
（2）取连接产物5 μL加入到200 μL大肠杆菌DH5α感受态中混匀,冰上放置30min；
（3）42℃水浴热击90sec，期间不要晃动EPP管，热击结束后立刻放冰上5m ...

谢谢！
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13楼2009-03-18 17:31:55
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zijing7391

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-3-18 00:00:
没连上……
你转一个环化的质粒看看

为什么说没连上，怎么才能知道是否连接上了，只能转化到感受态细胞中吗？
赞一下 回复此楼
14楼2009-03-18 17:37:56
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