应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr时 目的条带不亮 引物二聚体明显为什么？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1628  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wpllrm

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr时 目的条带不亮 引物二聚体明显为什么？ 已有2人参与

大家好 我是实验新手 最近pcr产物电泳时发现目的条带不亮 但是有 而引物二聚体很明显 求各位大神指导。pcr条件预变性95度五分钟 变性95度三十秒 退火55度三十秒 延伸72度1分钟 总延伸72度5分钟42个循环。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-01-30 15:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒悍

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
发个电泳结果图片吧，看跟我之前的问题一样不？
赞一下 回复此楼
直面惨淡人生的猛男
5楼2018-01-31 01:16:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-01-31 11:06:44
你这个问题可以通过调节退火温度来解决。对于样本很多实验，引物拿到后，可以设置一个温度梯度的pcr，确定这个引物的最佳退火温度。如果是你自己设计引物的话，比Tm值低2-3度即可选择为退火温度，这个视具体情况而定。还可以通过二轮pcr富集你的目的条带，总之途径很多。你可以参考一下。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-01-30 17:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karisq33

铜虫 (小有名气)
引物不匹配吧

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
3楼2018-01-30 17:07:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wpllrm

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by peitaokong at 2018-01-30 17:05:19
你这个问题可以通过调节退火温度来解决。对于样本很多实验，引物拿到后，可以设置一个温度梯度的pcr，确定这个引物的最佳退火温度。如果是你自己设计引物的话，比Tm值低2-3度即可选择为退火温度，这个视具体情况而定 ...

谢谢我在摸索摸索

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-30 18:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 332求调剂 +7 蕉蕉123 2026-03-28 7/350 2026-03-29 08:25 by fmesaito
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:23 by fmesaito
[考研] 调剂310 +8 温柔的晚安 2026-03-25 9/450 2026-03-29 08:19 by fmesaito
[考研] 329求调剂 +7 星野? 2026-03-26 7/350 2026-03-29 06:43 by 544594351
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 5/250 2026-03-29 00:23 by MRMFYTL
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 5/250 2026-03-28 21:26 by zhq0425
[考研] 332求调剂 +4 @MZB382400 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:02 by 唐沐儿
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +4 26要上岸 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:30 by 1018329917
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭