应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr时 目的条带不亮 引物二聚体明显为什么？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1627  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wpllrm

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr时 目的条带不亮 引物二聚体明显为什么？ 已有2人参与

大家好 我是实验新手 最近pcr产物电泳时发现目的条带不亮 但是有 而引物二聚体很明显 求各位大神指导。pcr条件预变性95度五分钟 变性95度三十秒 退火55度三十秒 延伸72度1分钟 总延伸72度5分钟42个循环。

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-01-30 15:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-01-31 11:06:44
你这个问题可以通过调节退火温度来解决。对于样本很多实验，引物拿到后，可以设置一个温度梯度的pcr，确定这个引物的最佳退火温度。如果是你自己设计引物的话，比Tm值低2-3度即可选择为退火温度，这个视具体情况而定。还可以通过二轮pcr富集你的目的条带，总之途径很多。你可以参考一下。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2018-01-30 17:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karisq33

铜虫 (小有名气)
引物不匹配吧

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
3楼2018-01-30 17:07:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wpllrm

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by peitaokong at 2018-01-30 17:05:19
你这个问题可以通过调节退火温度来解决。对于样本很多实验，引物拿到后，可以设置一个温度梯度的pcr，确定这个引物的最佳退火温度。如果是你自己设计引物的话，比Tm值低2-3度即可选择为退火温度，这个视具体情况而定 ...

谢谢我在摸索摸索

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2018-01-30 18:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寒悍

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
发个电泳结果图片吧，看跟我之前的问题一样不？
赞一下 回复此楼
直面惨淡人生的猛男
5楼2018-01-31 01:16:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wpllrm 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂310 +8 温柔的晚安 2026-03-25 9/450 2026-03-29 08:19 by fmesaito
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 299求调剂 +8 15188958825 2026-03-25 8/400 2026-03-29 01:36 by fmesaito
[考研] 0703化学调剂，求导师收 +9 天天好运来上岸� 2026-03-24 10/500 2026-03-28 22:17 by chemzp
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 材料与化工考研调剂 +17 孅華 2026-03-22 17/850 2026-03-28 08:35 by WYUMater
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 283求调剂（080500） +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭