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Michael ~

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大神解答,为什么我的TA克隆重组一直连不上去已有6人参与

我用的载体是PUC19-GFP,目的片段是1300多bp。加A反应体系:dd水 0.3ul,PCR扩增片段 20ul,Buffer 2.5ul,dNTP 2ul.rTaq 0.2ul,反应条件72℃30min。载体骨架和目的片段胶回收纯化之后浓度和纯度都很好,连接体系就是1:2,1:8,1:16都用过,而且也把三种比例放一个板上转化过,都没有成功,一个斑都没有
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Korea??

新虫 (正式写手)


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引用回帖:
22楼: Originally posted by Michael ~ at 2018-03-27 09:55:03
羡慕羡慕我纠缠到现在还是没连上,已经抛弃TA,换重组酶做了,再连不上怕是真要凉了...

你能做出来的,有好结果分享哈!

发自小木虫IOS客户端
23楼2018-03-28 21:39:52
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化对照做了吗?
抗生素?
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-01-23 03:07:12
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hubeigxkkk

新虫 (初入文坛)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-02-17 12:17:56
连接比列不是很关键。你的这个是T载体吗?以前TA克隆有问题吗?感受态有问题吗?你描述的也不清楚,中间很多环节都有可能有问题
3楼2018-01-25 15:42:33
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遊俠

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个加A体系。。合适吗?

发自小木虫Android客户端
4楼2018-01-29 23:22:58
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