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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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狂风,。

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序 已有1人参与

猪病毒毒株的测序,测序结果出来后如何对比?如何制作进化数?需要使用哪些软件?跪求大神,最好详细点,本人刚接触。

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Korea??

新虫 (正式写手)

我也第一次接触,看不太明白

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3楼2018-03-21 15:21:30
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majorbio

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

对于进化树的构建,如果对理论的了解不深入,选择模型的时候用NJ或者ML建树较为妥当。对于初学者,小编首推MEGA软件,因为它是Nei开发的方法并设计的图形化软件,使用起来非常方便。

MEGA(Molecular Evolutionary Genetics Analysis,分子进化遗传分析),可用于序列比对、进化树的推断、估计分子进化速度、验证进化假说等。最新版本:MEGA 6.06 for windows,可以从 http://www.megasoft ware.net/免费下载。



接下来,就是用MEGA构建系统进化树的简明流程(具体细节请参考MEGA教程和使用说明):

1. 准备序列文件:准备fasta格式序列文件(fasta格式:大于号>后紧跟序列名,换行后是序列)把所有序列放在同一fasta文件内,注意:所有序列的方向都要保持一致(5’ – 3’)。

核酸序列:

>gene1

CCGTTAGCATGCCAGGCTCCGCATAAAGA

氨基酸序列:

>gene1

MQSPINSQMAEMAEQFGFSNNMAGSIAF

2. 多序列比对:打开MEGA,选择“Align”–“Edit /Build Alignment”,选择“Create a new alignment“。



根据输入文件中序列类型,选择“DNA”或者 “Protein”。在弹出“M6:Alignment Explorer”窗口中选择“Data”-“Open”-“Retrieve Sequences from File”, 找到准备好的序列文件并打开。



就会看到如下图所示的序列展示界面:



3. 在打开的窗口中选择“Alignment”-“Align by  ClustalW“ 进行对齐,在弹出的“M6:ClustalW   Parameters”中调整参数,然后点击“OK”。对齐过程需要一段时间,对齐完成后,最好将序列两端切齐,选择两端不齐的部分,单击右键,选择delete即可。

4. 关闭当前窗口,关闭的时候会提示是否保存,点击保存,保存的文件格式是.mas。回到MEGA 6.06主窗口,选择“File”或者“Data”-“Open A File/Session…“,在弹出窗口中选择”Analyze”即可。

5. 在菜单栏中选择“Phylogeny”-“Construct/ Test  Neighbor-Joining Tree…”-“yes”,打开一个窗口,里面有很多参数可以设置,如何设置这些参数请参考详细的MEGA说明书,不会设置就暂且使用默认值,不要修改,点击下面的Compute按钮,系统进化树就画出来了。



6. 最后,使用TreeExplorer窗口中提供的一些功能可以对生成的系统进化树进行调整和美化。另外,还可以用Word进一步编辑MEGA构建的进化树。
2楼2018-03-20 15:28:41
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