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speculiar

银虫 (小有名气)

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[交流] 做过透析袋纯化DNA的请进

我做过两次，都回收不到DNA。好像DNA在仍然在胶里没跑出来。。。。。
请问做透析袋纯化大片段DNA有哪些要注意的？另外有没有更好的纯化大片段DNA的方法呢？

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1楼 2009-02-26 22:58:59

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tangxiaofu1982

新虫 (初入文坛)

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不知道楼主的DNA片段有多大?我以前有做过电洗脱透析回收,我的目标片段是200kb以上的，也有回收到，只不过回收后跑胶一看却只有20几kb。我电洗脱用的是那种普通的直流电泳，后来有一个国外回来的老师教我们做的时候，电洗脱人家是用脉冲电泳就没这种问题。
另外我还用过低熔点琼脂糖加琼脂糖酶消化，最后再用milipore的超滤离心管纯化一下就好了。这个过程感觉比较简单方便。
虽然最后我还是没能成功回收我的目标片段，但是也没遇到过楼主说的那种问题。会不会是你的透析带没用缓冲液充满，扎紧后有气泡或是胶没被没过啊？还有就是电泳槽里缓冲液不够？