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llgh-szwy

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR问题求助

最近在做两个基因及其截短的原核表达。
但是全长能够P出来截短无论如何也P不出
用过Ko的和Primer star两种酶
试过梯度和两步法,退火温度均在55度以上。

PCR问题求助
[CYZUXYLI6R0`694DX1XGIN.png
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learner_zyj

新虫 (小有名气)

4楼2017-12-07 18:36:48
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竹叶水

银虫 (初入文坛)

模板量低吧,marker左边那个是全长的?亮度也不高啊,另外上样量是否少了点儿,循环次数是否少了一些?

发自小木虫Android客户端
2楼2017-12-07 12:32:50
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llgh-szwy

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 竹叶水 at 2017-12-07 12:32:50
模板量低吧,marker左边那个是全长的?亮度也不高啊,另外上样量是否少了点儿,循环次数是否少了一些?

上样3μl,循32个循环,1μl的模板,这已经是产物再P了一次了。。。
请问还有什么别的可能吗。。?
3楼2017-12-07 17:11:43
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匿名

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5楼2018-02-03 16:17:16
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