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构载体时 ，菌批和质批都有条带，双酶切没有目的片段，是怎么回事？已有1人参与
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构载体时 ，菌批和质批都有条带，双酶切没有目的片段，是怎么回事？ 发自小木虫Android客户端 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
安尘懂起: 金币+10, ★有帮助 2017-12-02 10:36:26
感谢参与，应助指数 +1
安尘懂起: 金币+10, ★有帮助 2017-12-02 10:36:26
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如果刚才0的方法片段能够克隆出来 且片段大小无误 基本上就是连上了 建议直接测序 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-12-02 10:15:15
2楼2017-12-01 22:47:46
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0不知道你做pcr的引物用的什么 联系 用载体上的一个引物 和自己基因上的一引物克隆 可以排除非质粒片段干扰 1确认条带大小 是否有误 确认酶切效率 2连接转化后多选些菌 做菌批 再酶切 3也可能由于酶切片段太小 电泳看不太出来 如果是这样 建议增加酶切模板 琼脂糖浓度加倍 跑电泳看看 4直接测序看看 理论上克隆出来了 应该问题不会太大 发自小木虫Android客户端 |
3楼2017-12-02 10:06:54
5楼2017-12-02 11:17:07