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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线，有的好，有的，可能是什么原因？
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xiao风铃

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线，有的好，有的，可能是什么原因？ 已有2人参与

各位大神，做了5板QPCR，3板溶解曲线是好的，2板不好，可能是什么原因，能帮忙分析一下吗？
五板为不同样品的同一基因的熔解曲线

QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线，有的好，有的，可能是什么原因？
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QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线，有的好，有的，可能是什么原因？-1
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1楼 2017-11-27 18:50:00
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般来说含量高一点的，起峰也早，扩增效果也好，也不会有杂带。如果含量很低的，起峰在30以后的，更容易扩出杂带，所以溶解曲线有杂峰。

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2楼2017-11-28 10:11:31
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6_pengfei

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的不同样品有什么区别啊，一般溶解曲线双峰都是引物非特异性结合造成的，我大胆猜测一下，如果你的引物是夸内含子的，有可能是基因组污染，造成扩增出大片段和小片段，二者溶解曲线不同。如果只是目标模板低，只要引物特异，是不会有溶解峰的。我对你样品不熟，只能猜测一番。
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努力精修
3楼2017-11-28 15:54:50
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