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xiao风铃

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线,有的好,有的,可能是什么原因? 已有2人参与

各位大神,做了5板QPCR,3板溶解曲线是好的,2板不好,可能是什么原因,能帮忙分析一下吗?
五板为不同样品的同一基因的熔解曲线

QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线,有的好,有的,可能是什么原因?
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QPCR不同样品的同一基因的熔解曲线,有的好,有的,可能是什么原因?-1
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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一般来说含量高一点的,起峰也早,扩增效果也好,也不会有杂带。如果含量很低的,起峰在30以后的,更容易扩出杂带,所以溶解曲线有杂峰。

发自小木虫Android客户端
2楼2017-11-28 10:11:31
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6_pengfei

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的不同样品有什么区别啊,一般溶解曲线双峰都是引物非特异性结合造成的,我大胆猜测一下,如果你的引物是夸内含子的,有可能是基因组污染,造成扩增出大片段和小片段,二者溶解曲线不同。如果只是目标模板低,只要引物特异,是不会有溶解峰的。我对你样品不熟,只能猜测一番。
努力精修
3楼2017-11-28 15:54:50
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