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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR中模板RNA与cDNA区别
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 胡爽157 at 2017-10-20 23:13:35
RNA容易降解，不稳定，所以一般转化成稳定的cDNA.

了解了，谢谢~
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11楼2017-10-21 23:53:00
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by cf沐晴 at 2017-10-20 23:28:11
要反转
...

好的，谢谢
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12楼2017-10-21 23:53:13
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by zl_real at 2017-10-20 23:42:14
荧光定量pcr也是pcr，pcr原理先搞明白，rna是单链，你怎么做pcr

我之前看书有那种一步法，好像是反转录和PCR在一个反应管中进行呢。
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13楼2017-10-21 23:53:55
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by didongwei at 2017-10-21 06:54:56
是哪位大神告诉你荧光定量可以用RNA做模板的？这个必须反转录成cDNA

啊哦，这个我在书上看到有那种一步法，就是反转录和pcr在一个反应管中进行呢。那你们反转录是拿试剂盒做吗？
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14楼2017-10-21 23:55:39
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 胡爽157 at 2017-10-20 23:13:35
RNA容易降解，不稳定，所以一般转化成稳定的cDNA.

那我提出来的RNA先放一段时间再反转录可以吗？还没买反转录的试剂盒。。。
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15楼2017-10-21 23:56:46
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didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
婷宝宝2013: 金币+2, ★有帮助 2017-10-23 08:21:47
引用回帖:
14楼: Originally posted by 婷宝宝2013 at 2017-10-21 23:55:39
啊哦，这个我在书上看到有那种一步法，就是反转录和pcr在一个反应管中进行呢。那你们反转录是拿试剂盒做吗？...

当然要用试剂盒……

发自小木虫IOS客户端
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不是优秀，而是不可替代
16楼2017-10-22 00:17:55
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山里的猫先森

新虫 (小有名气)
要逆转啊傻孩子。。。模版RNA逆转后就是你的CDNA，顺便借楼请教各位大神，没有明显对照组实验组之分的qPCR结果要怎么处理。有A、B两个大组，每组又各有三个不同来源的样本，最后要比较A、B两个大组之间的 表达差异。
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17楼2017-10-22 21:23:47
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18140670811

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by didongwei at 2017-10-21 06:54:56
是哪位大神告诉你荧光定量可以用RNA做模板的？这个必须反转录成cDNA

RNA不能做PCR反应的模板，你荧光定量体系里加的是DNA聚合酶啊，不是RNA聚合酶或逆转录酶。

发自小木虫Android客户端
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18楼2017-10-26 22:28:09
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婷宝宝2013

银虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 18140670811 at 2017-10-26 22:28:09
RNA不能做PCR反应的模板，你荧光定量体系里加的是DNA聚合酶啊，不是RNA聚合酶或逆转录酶。
...

知道啦。灰常感谢
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19楼2017-10-27 08:00:13
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15364072051

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 婷宝宝2013 at 2017-10-21 23:52:37
那cDNA是用试剂盒反转录的吗？...

是的  用试剂盒将RNA反转成cDNA才能进行qPCR
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老鼠卖大米
20楼2019-05-07 20:20:23
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