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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助，普通PCR结果无法重复
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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)

[求助] 求助，普通PCR结果无法重复

图片2是第一次做出来的结果，条带可以自动检测出来，就是不太亮，有拖带。

后来，无论怎么做都是差不多的图片1这种情况，阴性空白都会出现最上方很亮的东西，最下方引物也不清晰，甚至有时没有最下方引物条带。
所有试剂都已经换过一遍，引物也有重新设计过，PCR程序一直都是一样的。请问，该如何解决？

求助，普通PCR结果无法重复
图片2.png


求助，普通PCR结果无法重复-1
图片1.png
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1楼 2017-10-17 16:55:21
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Berza

金虫 (正式写手)
DNA纯度怎么样？没放很久吧？引物有做特异性实验吗？

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MADAMADADANE
2楼2017-10-17 17:02:24
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苏哲然

新虫 (小有名气)
看我以前发的帖子，我也出现这种污染

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古老而不可思议，深爱并异想天开
3楼2017-10-17 17:09:40
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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Berza at 2017-10-17 17:02:24
DNA纯度怎么样？没放很久吧？引物有做特异性实验吗？

测过Nanodrop，做出来的那个纯度反倒没有没做出来的好。A260/A280是1.90，A260/A230是2.06。提取和纯化用的都是QIAGEN的试剂盒
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4楼2017-10-18 15:50:41
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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 苏哲然 at 2017-10-17 17:09:40
看我以前发的帖子，我也出现这种污染

那请问有解决么，其实我主要问题还是根本找不到无法重复实验的原因，所以现在根本无法继续进行后续实验
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5楼2017-10-18 15:55:30
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