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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)

[求助] 求助,普通PCR结果无法重复

图片2是第一次做出来的结果,条带可以自动检测出来,就是不太亮,有拖带。

后来,无论怎么做都是差不多的图片1这种情况,阴性空白都会出现最上方很亮的东西,最下方引物也不清晰,甚至有时没有最下方引物条带。
所有试剂都已经换过一遍,引物也有重新设计过,PCR程序一直都是一样的。请问,该如何解决?

求助,普通PCR结果无法重复
图片2.png


求助,普通PCR结果无法重复-1
图片1.png
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Berza

金虫 (正式写手)

DNA纯度怎么样?没放很久吧?引物有做特异性实验吗?

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MADAMADADANE
2楼2017-10-17 17:02:24
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苏哲然

新虫 (小有名气)

看我以前发的帖子,我也出现这种污染

发自小木虫Android客户端
古老而不可思议,深爱并异想天开
3楼2017-10-17 17:09:40
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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Berza at 2017-10-17 17:02:24
DNA纯度怎么样?没放很久吧?引物有做特异性实验吗?

测过Nanodrop,做出来的那个纯度反倒没有没做出来的好。A260/A280是1.90,A260/A230是2.06。提取和纯化用的都是QIAGEN的试剂盒
4楼2017-10-18 15:50:41
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吐司布丁

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 苏哲然 at 2017-10-17 17:09:40
看我以前发的帖子,我也出现这种污染

那请问有解决么,其实我主要问题还是根本找不到无法重复实验的原因,所以现在根本无法继续进行后续实验
5楼2017-10-18 15:55:30
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