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镍柱纯化的蛋白能不能拿来直接做实验?
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catmax
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 71
帖子: 32
在线: 15小时
虫号: 5574913
[交流]
镍柱纯化的蛋白能不能拿来直接做实验?
老板其实是做材料的,材料已经合成好了,目前是在做应用实验,简单说来就是拿我们合成的材料去吸附蛋白。这个蛋白是一个重组蛋白,质粒由别院师兄提供,转入大肠杆菌后进行表达,诱导出的蛋白用镍柱纯化。
因为我不是生物专业的,所以一些基本知识还不够全面。
目前我有几个问题想请教大家:
1. 纯化后的蛋白浓度是直接用BCA可以测得吗?那稀释BSA的缓冲溶液是用PBS还是Elution buffer?
2. 纯化后的蛋白能直接拿去做吸附实验吗?或者是需要进行透析之类的把盐除去?
3. 纯化后的蛋白有没有活性?
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风追素心
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1.8
帖子: 3
在线: 36.4小时
虫号: 4364084
★
catmax(金币+1): 谢谢参与
纯化后的蛋白浓度可以直接用BCA测得,稀释BSA我们用去离子水配制的。
纯化后的蛋白透析后可以用于吸附实验。
纯化后的蛋白有活性。
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4楼
2017-10-24 11:30:14
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