| 查看: 1839 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
饿的神啊新虫 (著名写手)
|
[求助]
hairpin for VIGS 已有1人参与
|
|
|
1、像这种反向互补序列是直接送公司合成的，还是设计一半的引物，然后让引物退火成双链？ 2、如果是直接合成的，插入载体种还要同时做正、反向插入吗？ 以下是原文描述，我不是很懂，求解。 The oligonucleotides PDS-54s and PDS-54as, corresponding to nt 1176–1220 of the Arabidopsis PDS cds, were hybridized to each other and cloned into the SnaBI site of E17-S in the sense or antisense orientation to generate E17-PDS-s and E17-PDS- as, respectively. The oligonucleotides PDS-IR37 and PDS-IR41, corresponding to nt 1176–1212 of the Arabidopsis PDS cds, were hybridized to each other and cloned into the SnaBI site of E17-S to generate E17-PDS-IR. The other VIGS vector constructs (pTY-PDS48-IR, pTY-PDS52-IR, pTY-PDS56-IR, pTY-PDS60-IR, pTY-PDS64-IR, pTY-PDS70-IR, pTYPDS76-IR, pTY-PDS2-IR and pTY-LFY-IR) were obtained by cloning the self-hybridized palindromic oligonucleotides PDS48, PDS52, PDS56, PDS60, PDS64, PDS70, PDS76, PDS2-IR and LFY-IR (corresponding to nt 911–949 of the LFY cds), respectively, into the SnaBI site of pTY-S. This small size therefore allows the introduction of foreign sequences in the viral genome by direct cloning of doublestranded synthetic oligonucleotides. To target a specific gene, we therefore advise that a self-hybridizing palindromic oligonucleotide of 76–80 nt, identical to the target gene sequence, be inserted into the SnaB1 site of pTY-S, so that hairpin RNAs bearing a stem of 36–38 nt and a 4 nt loop could be generated.  hp.png |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
饿的神啊
新虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 5982.7
- 散金: 122
- 帖子: 1004
- 在线: 66.3小时
- 虫号: 2477988
- 注册: 2013-05-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
5楼2017-10-11 09:30:04
2楼2017-10-10 13:01:00
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 26721.3
- 散金: 410
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 8002
- 在线: 973.2小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
3楼2017-10-10 15:01:14
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 26721.3
- 散金: 410
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 8002
- 在线: 973.2小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
4楼2017-10-10 15:01:59
