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18115179716

金虫 (正式写手)

[求助] DNA琼脂糖跑胶结果分析 已有1人参与

鼠尾genotyping,PCR后跑胶,因为中途有事,在EB里泡了40分钟,然后照胶,发现:
1.100bp的maker跑不出来,绝对没有跑出去
2.每个泳道的背景都很强
3.百分之百有条带的基因(上面一行样品在500bp左右应该有条带)没有看到明显的条带
4.每个泳道前沿都有一团白色
以前只在EB里泡20-30分钟,虽然100bp的maker经常跑不出来,但不至于阳性条带不出现,也不会有一团白色,背景也比较低。难道真的是EB泡的时间过长?
请帮我分析一下什么原因,谢谢。注:maker是100bpDNA ladder,2%agarose.
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18115179716

金虫 (正式写手)

2楼2017-09-13 13:18:31
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喵来了耗子

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
时间长不会影响你的条带有无的,我之前一晚上都泡过。背景过强跟浸泡时间倒是有关系。你所说的泳道前沿白色的一团,应该是指引物二聚体吧,跑电泳一般都会有的
3楼2017-09-13 16:43:33
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