24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 12243  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sevenwish

新虫 (小有名气)

[求助] 鼠尾基因型鉴定,总P不出目的条带。

我们定了一批KO小鼠,做基因型鉴定。总使用含有SDS的lysis buffer 以及家蛋白酶K 裂解鼠尾,然后用乙醇沉淀基因组DNA。基因组我跑了电泳,有蛋白残留,在孔里,但是基因组DNA确实有条带。     后面进行PCR,有一个目的条带3.9k.始终p.不出来,其他两个条带1K和0.5k都可以。   改变了条件,使用高保真都没出现过。  而且奇怪的是的,在WT本不该有1K,但是,有了。   现在人没在实验室,我过一会发个图。  求大神解释原因可能在哪?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不吃M的鱼

金虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-09 19:26:47
长的确实不好P,可能酶不一样,也有可能模板提的质量不怎么好,原因很多。建议你设计一对短的引物试试。你们敲除的前段应该不长吧,为什么要用这么长的引物坚定呢?

发自小木虫Android客户端
4楼2017-09-09 08:47:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

不吃M的鱼

金虫 (小有名气)

3.9k是不是有点长了不好扩增?我做鱼的,长的有时候不太好扩

发自小木虫Android客户端
2楼2017-09-09 08:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sevenwish

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 不吃M的鱼 at 2017-09-09 08:38:53
3.9k是不是有点长了不好扩增?我做鱼的,长的有时候不太好扩

确实不好p,但是,公司那边做出来没问题,我们就是重复不出来。给另一个老师做的鉴定,他们的很短,很好p,所以应该排除操作原因。条件也换过很多。延伸到5分钟都没有,高保真也没有。

发自小木虫Android客户端
3楼2017-09-09 08:45:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bsese

至尊木虫 (文坛精英)

山顶拟诗 歌得吧贺
5楼2017-09-09 08:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂:085600材料与化工,考材科基,总分319 +16 678lucky 2026-03-31 20/1000 2026-03-31 18:48 by JourneyLucky
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +11 Nadiums 2026-03-25 12/600 2026-03-31 18:24 by oooqiao
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +11 秋二十二 2026-03-30 11/550 2026-03-31 18:09 by 253863592
[考研] 328求调剂 +5 鹏鹏碰嘭嘭 2026-03-24 5/250 2026-03-31 17:42 by 544594351
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +6 小小机灵虫 2026-03-29 12/600 2026-03-31 16:58 by 记事本2026
[考研] 263求调剂 +3 DDDDuu 2026-03-27 3/150 2026-03-31 16:21 by 土木硕士招生
[考研] 调剂申请 +6 张张张张zy 2026-03-31 6/300 2026-03-31 14:20 by 记事本2026
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-30 6/300 2026-03-31 12:19 by 唐沐儿
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 130+3 Yishengeryi 2026-03-30 3/150 2026-03-31 10:10 by 北京莱茵润色
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂!!! +5 贝呗钡钡 2026-03-30 5/250 2026-03-30 18:16 by 无际的草原
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 085404求调剂,总分309,本科经历较为丰富 +6 来财aa 2026-03-25 6/300 2026-03-30 09:48 by 青海小西牛
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
信息提示
请填处理意见