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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序问题 已有5人参与

设计引物做pcr，产物电泳后条带很亮，可是为什么测序总是测不出来，测序结果总是失败？

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1楼 2017-08-24 15:23:54
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李媛媛媛

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 18853812522 at 2017-09-05 21:00:52
我都是连接转化以后去送测序的，每次基本上都是成功的，建议你试试

你好，我是每次测序基本都会失败。只是做简单的克隆而已，不明白测序失败的原因。我用的是DH5a,基因特异性引物，每次送样前自己菌液PCR都有条带，但送公司（华大）都会说失败。很沮丧啊。求助。
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20楼2017-10-05 21:06:25
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bbass533

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-28 06:34:23
本帖内容被屏蔽
2楼2017-08-24 15:25:36
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luoyl210

新虫 (著名写手)
送克隆菌去测序会好一些

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3楼2017-08-24 15:37:27
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曼陀罗爱上黑夜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-08-24 15:25:36
不建议送pcr产物去测序，最好是连接载体再测。不然会出现很多你想不出来的问题

原来是这样啊！可是连载体不会很麻烦吗？什么防止载体自连还有粘性末端什么的

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4楼2017-08-24 15:58:48
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