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ABI 7500 荧光定量扩增曲线 已有2人参与
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qPCR 我扩增的溶解曲线非S形，不知道是什么原因？求助！谢谢！！！ 图片jpg.png |
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冷雁孤旅
木虫 (著名写手)
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- 专业: 环境微生物学
4楼2017-08-12 07:35:36
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-08-11 12:43:47
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-08-11 12:43:47
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1. 建议跑一下电泳看一下目的条带亮度和完整性，这样的情况一般浓度是比较低，扩增效率低的结果，如果是这样的话建议增加产物浓度，减少引物量（如0.2uM each），可以增加引物特异性，当然检查试剂盒的情况，是否按照说明书去做，或者换一个扩增效率更高的试剂盒 2.如果量少，产物里阻碍物比较多，什么曲线都会产生，前面几张图峰值不是很高的那几个只是将原始的曲线放大了而已，相较于正常的溶解曲线可以忽略不计 3.检查模板来源，提取的时候浓度、完整性、污染情况。 |
2楼2017-08-10 16:41:00
3楼2017-08-10 20:43:43
5楼2017-08-12 07:41:04
