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PCR扩增的条件设计,求助!已有1人参与
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我做微生物的,我有一株菌株的质粒进行全测序了,我要扩增里面的一个基因,引物设计好了,由于要扩这基因的全长,引物并不是那么的完美,现在怎么设计pcr反应条件,模板gc含量0.65,怎么办?我这个学渣不知道怎么办了,求大神帮助!!! 发自小木虫Android客户端 |
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chiden
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2楼2017-08-10 10:57:39
3楼2017-08-10 16:54:13
手残 按了发送 请原谅,继续哈!第二,退火温度选择,一般设计引物的Tm值为60以上,根据实际情况,从引物低5度开始设置梯度,间隔2度,一般最高65度。第三,延伸时间,常用延伸温度72度,延伸时间根据你的系列长短决定发自小木虫IOS客户端 |
4楼2017-08-10 16:59:39

5楼2017-08-22 11:32:18













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请原谅,继续哈!第二,退火温度选择,一般设计引物的Tm值为60以上,根据实际情况,从引物低5度开始设置梯度,间隔2度,一般最高65度。第三,延伸时间,常用延伸温度72度,延伸时间根据你的系列长短决定