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由然爱吃肉

新虫 (初入文坛)

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10楼: Originally posted by 小书生gg at 2017-08-02 13:23:13
你怎么知道是没转进去呢？不管是电转还是化转，效率都很高啊。不知道你的目的蛋白是什么，你可以试着换一下涂板的培养基。

是关于spx的，已经涂过好几次平板，每次的平板都还是不一样的。？大概平板没问题了

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11楼2017-08-02 14:01:02

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小书生gg

新虫 (小有名气)

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不是，是培养基的成分的问题。有的蛋白想内毒素等的毒力因子，因为乳糖的存在在初期就能表达，毒力因子自身杀死菌体，所以不会长。也有可能重组载体没能连接成功，致使缺少抗性，导致菌体不长。

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12楼2017-08-02 14:23:09

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某某某鸽子

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-08-01 22:38:46
电转原理：
电转化法是利用瞬间高压在细胞上打孔，因而需用冰冷的超纯水多次洗涤处于对数生长前期的细胞，以使细胞悬浮液中应含有尽量少的导电离子。转化效率为109～1010 转化子/礸 DNA；对于热激法，是利用冰冷的 ...

想请教一下您，质粒浓度在350ng/μL左右，感受态细胞50μL，电转时质粒要加入多少量呢？还有一个问题是感受态细胞的浓度对电转效率有影响吗？一般电转时感受态细胞浓度多少好呢？比如我取50ml菌液做感受态细胞，多次洗后，最后用10%甘油200μL重悬分装，这个浓度高吗？应该在最后用多少量的10%甘油重悬呢？

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13楼2020-11-18 09:43:46

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