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请,你微笑

新虫 (初入文坛)


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重叠延伸PCR求助
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我做重叠延伸PCR连接大片段的时候总是不出目的条带,并且会出一些固定的杂带,但都不是小片段的大小。期间调整过温度,模板浓度,引物浓度都没起作用,求各位大神帮忙!!!下图为PCR结果,上图的目的片段为2500,下图的目的条带为3092。

重叠延伸PCR求助


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六维空想

新虫 (小有名气)



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你是怎么做的  这么大的片段不算难吧

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7楼2017-07-31 06:28:33
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请,你微笑

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 六维空想 at 2017-07-31 06:28:33
你是怎么做的  这么大的片段不算难吧

比如我有四个片段1,2,3,4。先用重叠延伸把1和2连起来(用1-2表示);3和4连起来(用3-4表示)。然后再将1-2和3-4作为模板,先不加引物让它搭桥P 15个循环,再加引物P 30个循环,最后想得到一个1-2-3-4连接起来的片段,约3000bp

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8楼2017-07-31 14:41:35
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王查查23

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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9楼2017-07-31 19:04:13
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2017-07-31 19:04:57
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phdl5楼
2017-07-30 18:18   回复  
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pandongzi3楼
2017-07-30 18:18   回复  
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zou13142楼
2017-07-30 18:18   回复  
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