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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » T-A克隆后做菌落PCR，出现两个条带.
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静默人声412

木虫 (小有名气)
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T-A克隆后做菌落PCR，出现两个条带.
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电泳照片如下，最底下的是引物，上面两条带最亮的是目的条带但是比我计算的小，但是第二条浅带不知道是什么带.质粒用的宝生物的PMD19（simple），感受态细胞JM109，用的该质粒的通用引物扩的.

T-A克隆后做菌落PCR，出现两个条带.


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1楼2017-07-24 17:47:28
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xu德德

新虫 (初入文坛)
★
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只要有你的目的条带就可以，其他的条带可以不看，这就是菌落pcr的不足

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10楼2017-07-25 07:44:36
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gufeng2008

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
菌落不纯造成的，PCR时可以稀释一下菌液，这样可能效果会好些。引物目的片段比非特异条带亮很多，影响不大。
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11楼2017-07-26 14:18:18
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phdl8楼
2017-07-24 17:49   回复  
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0918200535楼
2017-07-24 17:48   回复  
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8520586837楼
2017-07-24 17:49   回复  
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smfstar4楼
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pandongzi6楼
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9979293749楼
2017-07-24 17:49   回复  
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明月的夜3楼
2017-07-24 17:48   回复  
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江城微度2楼
2017-07-24 17:48   回复  
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