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匿名

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zhouxfd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-19 14:03:50
昨天做了,没有处理直接做了转化,没有爆。但是一个也没有长,不知道咋回事。我得感叹下,我真的好忧伤~...

电击之前的时间是几毫秒,电击之后的时间是几毫秒?
13楼2017-07-20 05:47:42
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晋鹏

版主 (知名作家)

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★ ★
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guoxhyy: 金币+2 2017-07-18 09:32:14
1、少没关系,只要有正确的就可以了。

2、感受态不好,也可能是没有连上。

3、看看是不是质粒自连: 作连接体系的时候,作阴性对照。把目标片段替换成水,和酶切过的质粒16℃过夜。转化后看看有没有长出菌落。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-17 12:14:44
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匿名

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3楼2017-07-17 13:01:32
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-19 07:42:48
推荐用Gibson方法构建,另外质粒太大热激效率可能降低,推荐用点击,不过产物需要透析脱盐,另外9K也不算太大啊,是不是low copy number plasmid
4楼2017-07-18 00:49:30
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