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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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匿名

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21楼2017-07-19 10:28:38
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jerry110

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17楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-18 16:12:05
酶切反复也做过三四次了，过夜也切过。我是真找不出理由啦。...

酶切载体或者片段浓度不能太多的，50uL体系，大约1ug质粒或者片段足够了，太多容易切不开，造成空载，个人建议，仅供参考，祝好！
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22楼2017-07-19 11:02:04
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wade123456

木虫 (知名作家)

快乐的小蜜蜂
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关键点还是在连接和转化上面，转化成功了，菌落大多数都会长的比较好
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陪伴是最长情的表白……
23楼2017-07-19 11:23:20
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匿名

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24楼2017-07-19 12:28:35
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stabilized

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21楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-19 10:28:38
你放在4度了吗，一般如果放在冰箱，一个月好像也没啥问题吧。我的问题是长得少，而且也都是假阳性。如果果真是抗生素的问题，那么失效的平板上应该是菌落会长很多才对呀~...

重新考虑连接和转化吧
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坚持！
25楼2017-07-19 15:02:18
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jerry110

新虫 (小有名气)
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24楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-07-19 12:28:35
空载转化后，应该会有好多菌落吧，但是我的少菌落。
...

pcr产物不好切，可以看一下内切酶说明书，我的经验是900ng左右，50uL体系，时间稍长一些，楼主可以尝试一下，仅供产考，祝好！
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26楼2017-07-19 15:27:54
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sh727986091

金虫 (小有名气)
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新构建的质粒？还是转原来保存的质粒？

发自小木虫Android客户端
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27楼2017-07-19 15:47:02
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匿名

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28楼2017-07-19 17:07:16
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匿名

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29楼2017-07-19 17:07:57
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30楼2017-07-19 17:08:00
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