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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题 蛋白带重影
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zhaer

木虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE问题 蛋白带重影

跑出来的样品带有重影，确切的说已经不重叠了，是两条看起来一样的带（应该是同一个蛋白），这个现象marker也很明显，正常的marker条带下还有一条带，请问这是怎么回事啊？

[ Last edited by zhaer on 2009-1-29 at 02:38 ]
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1楼 2009-01-28 23:29:57
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zhaer

木虫 (小有名气)
嗯，小电流应该是好些。今天又跑了下，制胶前测了下分离胶pH差一点不到8.8，调回去以后电流用40 mA（双胶），貌似重影现象减少了，不过还是有，只是没那么明显了。极其不明白为什么，除了本身就是两种蛋白还有什么原因能跑成两条带。

[ Last edited by zhaer on 2009-1-30 at 10:57 ]
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9楼2009-01-30 10:51:38
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shadowfly

木虫 (小有名气)
是不是加完上样缓冲液后没有煮沸？
最好是发图看一下，是所有的蛋白下面都有重影还是某些特定的才有？
再考虑一下胶的问题，配制胶的药品都重配一下吧

才初三就又开始试验啦？致敬一下····
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2楼2009-01-29 00:26:47
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zhaer

木虫 (小有名气)
照得有点不清楚，不过还能看见，样品也有双带不过marker更明显些。
基本上每条带都有，什么原因哪，很晕。贮液都是新配的。。。

[ Last edited by zhaer on 2009-1-29 at 02:41 ]
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3楼2009-01-29 02:39:26
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shadowfly

木虫 (小有名气)
方法是和平时一样吗？包括电压、室温等等？

还有，上样前是否加上样buffer后煮沸了？包括marker？

[ Last edited by shadowfly on 2009-1-29 at 18:07 ]
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4楼2009-01-29 18:04:53
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