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zhaer

木虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE问题 蛋白带重影

跑出来的样品带有重影,确切的说已经不重叠了,是两条看起来一样的带(应该是同一个蛋白),这个现象marker也很明显,正常的marker条带下还有一条带,请问这是怎么回事啊?

[ Last edited by zhaer on 2009-1-29 at 02:38 ]
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shadowfly

木虫 (小有名气)

我认为一般蛋白重影主要是分辨率差的问题,主要是缓冲液和药品时间长了,也有些是电压和电流比较大的问题,还有可能是样品处理的问题,不好一概而论。

marker是哪个公司的?换一个再试试

······该不会是你的上样缓冲液的问题吧,要不你用个预染的marker试试,确定一下·
10楼2009-01-30 23:57:27
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shadowfly

木虫 (小有名气)

是不是加完上样缓冲液后没有煮沸?
最好是发图看一下,是所有的蛋白下面都有重影还是某些特定的才有?
再考虑一下胶的问题,配制胶的药品都重配一下吧

才初三就又开始试验啦?致敬一下····
2楼2009-01-29 00:26:47
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zhaer

木虫 (小有名气)

照得有点不清楚,不过还能看见,样品也有双带不过marker更明显些。
基本上每条带都有,什么原因哪,很晕。贮液都是新配的。。。

[ Last edited by zhaer on 2009-1-29 at 02:41 ]
3楼2009-01-29 02:39:26
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shadowfly

木虫 (小有名气)

方法是和平时一样吗?包括电压、室温等等?

还有,上样前是否加上样buffer后煮沸了?包括marker?

[ Last edited by shadowfly on 2009-1-29 at 18:07 ]
4楼2009-01-29 18:04:53
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