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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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皮皮璐

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR后核酸电泳没有条带 已有2人参与

我是7月12号提的细菌基因组,7月14号跑的PCR ,但是为什么跑不出条带?之前提的基因组是可以的,所以我想富集一下割胶送去测序,可是跑了两次都没出现条带,各位大神指点。

PCR后核酸电泳没有条带


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921293056

银虫 (初入文坛)

5楼2017-07-16 15:30:36
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查看全部 10 个回答

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-07-15 23:29:46
1、是否已经P出来了呢?

2、如果没有。可能有如下原因:  
1.模板:含有抑制物,含量低  2.Buffer对样品不合适  
3.引物设计不当或者发生降解  
4.反应条件:退火温度太高,延伸时间太短  

对策:  
1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量  2.更换Buffer或调整浓度  
3.重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物  4.降低退火温度、延长延伸时间
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-07-15 15:57:30
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皮皮璐

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-15 15:57:30
1、是否已经P出来了呢?

2、如果没有。可能有如下原因:  
1.模板:含有抑制物,含量低  2.Buffer对样品不合适  
3.引物设计不当或者发生降解  
4.反应条件:退火温度 ...

嗯嗯,谢谢,真棒

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3楼2017-07-15 16:13:21
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双鱼座的瓶盖

金虫 (小有名气)

感觉没P出来,是不是扩增程序有问题呢?

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4楼2017-07-15 19:02:31
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