应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 菌落（液）PCR
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 860  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

含笑~

银虫 (正式写手)

[交流] 菌落（液）PCR

要鉴定微生物，需要扩增16S rDNA,现用试剂盒提取菌液的基因组DAN，一是能提出来的扩增不出来，而是部分菌液的DNA提不出来，听说可用菌落（菌液）直接做PCR模板，但好像主要用于质粒，不知道可否做细菌（古菌）16S rDNA的模板？先谢过了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-01-16 15:36:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
古菌的没有做过，细菌的很好作的，可以直接拿到16S
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-01-16 16:21:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lly401064

木虫 (初入文坛)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~欢迎常来生物版~
如果细胞壁不是很厚，就可以
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2009-01-16 18:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mylove0xy03

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2009-01-16 20:03:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

含笑~

银虫 (正式写手)
谢谢各位了！能否再说下具体的方法或经典文献？我知道有一种方法是用沸水煮，然后离心取上清做模板。另外对PCR体系等有无特别要求。
赞一下 回复此楼
5楼2009-01-17 11:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnliu51

金虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+0):多谢参与讨论，欢迎常来生物版~~ 1-19 14:52
lwf991229(金币+1):3Q~ 1-19 14:52
批菌落的方法：50ul纯水于pcr管中，用灭菌牙签挑取待测菌落溶到pcr管的水中，不用很多，管中水略混即可。该管上pcr仪95度15min。取出管，上离心机4000转3min，将菌体离心下来，取上清进行pcr反应，一般10ul体积取1ul即可。
赞一下(20人) 回复此楼
6楼2009-01-18 05:56:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

steel1976

★
lwf991229(金币+1):多谢参与讨论，欢迎常来生物版~~ 1-19 14:52
细菌一般都可以的，用小的Tip头，在细菌上直接沾一下，然后放到已配好的反应体系中，吹打几次，直接PCR就行了。我用这种方法鉴定了很多细菌。也有菌液PCR的，就是取一部分菌液做模板
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2009-01-19 08:26:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongxiong5900

木虫 (小有名气)
支持6楼，我也是这样做的，结果很好
细菌一般都可以的，用小的Tip头，在细菌上直接沾一下，然后放到已配好的反应体系中，吹打几次，直接PCR就行了
赞一下 回复此楼
8楼2009-01-19 11:03:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
50ul的PCR体系用1ul菌液就可以做PCR了，如果是菌落，用枪头沾下就可以了。常温菌在PCR预变性时自然裂解。我们这里做基因组时都是这么验证的。
赞一下 回复此楼
9楼2009-01-20 15:26:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 含笑~ 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 07化学280分求调剂 +8 722865 2026-03-23 8/400 2026-03-26 20:00 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 7/350 2026-03-26 19:18 by macy2011
[考研] 274求调剂 +14 顾九笙要谦虚 2026-03-24 20/1000 2026-03-26 18:15 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 8/400 2026-03-25 20:34 by 热情沙漠
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭