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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助HRM筛查中的困惑
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiaomckeyan

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 求助HRM筛查中的困惑

求助各位大神：小的现在刚学着做HRM筛查突变。结果曲线上可明显看出有分型。可是测序结果却都是一样的。已经复查了，用的样品引物都没问题，实在想不通为啥。

求助HRM筛查中的困惑
IMG_20170609_193216.jpg
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1楼 2017-06-14 21:56:01
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bbass533

主管区长
本帖内容被屏蔽
4楼2017-06-16 11:43:52
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bbass533

实习版主
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-16 08:06:04
本帖内容被屏蔽
2楼2017-06-15 10:45:54
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xiaomckeyan

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-06-15 10:45:54
你是怎么测序的？HRM灵敏度很高的，看曲线是明显有差异，测序结果一致，说不过去。

测序结果比对过确实是欲研究序列。我用的测序引物和HRM引物不同，前者产物更长。现在怀疑HRM引物有问题，可是引物引用自权威的文献，并且我也BLAST过：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/primertool.cgi?ctg_time=1497541511&job_key=nJZD3Xe9ehVdL-oq50rOGJ1R3yqwQsQ3sQ，确实可用。实在想不明白，难道厂家合成错了？！
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3楼2017-06-16 01:11:53
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xiaomckeyan

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
4楼: Originally posted by bbass533 at 2017-06-16 11:43:52
你直接将HRM后的产物送去测序的吗？送前是否点样看过条带，单一吗？...

不是，我是用另外的引物扩增后送测序。因为该引物产物更长。测序前条带非常好。

发自小木虫Android客户端
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5楼2017-06-16 15:50:02
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