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xiaomckeyan

新虫 (初入文坛)

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[求助] 求助HRM筛查中的困惑

求助各位大神：小的现在刚学着做HRM筛查突变。结果曲线上可明显看出有分型。可是测序结果却都是一样的。已经复查了，用的样品引物都没问题，实在想不通为啥。

IMG_20170609_193216.jpg

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1楼 2017-06-14 21:56:01

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xiaomckeyan

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引用回帖:

2楼: Originally posted by bbass533 at 2017-06-15 10:45:54
你是怎么测序的？HRM灵敏度很高的，看曲线是明显有差异，测序结果一致，说不过去。

测序结果比对过确实是欲研究序列。我用的测序引物和HRM引物不同，前者产物更长。现在怀疑HRM引物有问题，可是引物引用自权威的文献，并且我也BLAST过：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/primertool.cgi?ctg_time=1497541511&job_key=nJZD3Xe9ehVdL-oq50rOGJ1R3yqwQsQ3sQ，确实可用。实在想不明白，难道厂家合成错了？！