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吴美儒

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 423.8
散金: 461
帖子: 73
在线: 25.4小时
虫号: 3320283
注册: 2014-07-12
性别: MM
专业: 生物化学

[交流] RACE 已有6人参与

做5'RACE的时候第一轮扩增的时候扩出单一条带，目的条带大小约613，扩增第二轮的时候总是产生拖带的现象！请问是什么原因了？

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1楼 2017-06-09 22:39:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Huobol

至尊木虫 (著名写手)

应助: 15 (小学生)
金币: 14473.1
散金: 70
红花: 7
帖子: 1274
在线: 162.9小时
虫号: 1214385
注册: 2011-02-26
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-06-10 23:28:08

引用回帖:

8楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-06-10 07:05:09
200倍不多，再稀释一下试试吧。我们以前稀释过1000或2000。
...

感觉够呛，看看楼主稀释更大倍数后能不能行，八成二轮引物不行，也许吧。
楼主，你第一轮条带单一，完全可以回收后连接克隆载体，送测序。不必非得做二轮PCR。看楼主一轮PCR挺不错的，就去链接T载体，送测序吧。
还有，可以用二轮的引物去做一轮PCR看看电泳条带如何，有带的话说明引物没啥问题，没有条带的话就是二轮的引物不成。

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